ABO血型和Rh血型的鉴定需结合抗原与抗体的血清学反应，通过正反定型及D抗原检测来确定血型为A+或A-。以下是具体方法与步骤：

一、ABO血型鉴定

ABO血型系统通过检测红细胞表面的A/B抗原和血清中的抗A/抗B抗体来确认。A型血的特点是红细胞表面有A抗原，血清中含抗B抗体。

1. 正定型（红细胞抗原检测）

方法：使用已知的抗A和抗B抗体试剂与待测红细胞反应。

试管法（准确性高）：

1. 取两试管，分别加入抗A、抗B血清各1滴；

2. 各加入待测红细胞悬液1滴；

3. 离心后观察凝集反应。若抗A管凝集则为A型。

玻片法（快速筛查）：

1. 在玻片上滴加抗A、抗B试剂各1滴；

2. 混入待测红细胞悬液，轻摇观察凝集。

2. 反定型（血清抗体检测）

方法：用已知的A型、B型试剂红细胞检测血清中的抗体。

步骤：

1. 两试管中分别加入待测血清和A型、B型试剂红细胞；

2. 离心后观察凝集。A型血清应与B型红细胞凝集，不与A型红细胞凝集。

3. 结果判读

A型血特征：

正定型：抗A凝集，抗B不凝集；

反定型：与B型红细胞凝集，与A型红细胞不凝集。

二、Rh血型鉴定（确认A+或A-）

Rh血型系统主要检测红细胞表面的D抗原。A+表示Rh阳性（有D抗原），A-表示Rh阴性（无D抗原）。

1. 检测方法

试管法：

1. 试管中加入抗D血清1滴；

2. 加入待测红细胞悬液1滴，离心后观察凝集；

3. 凝集为Rh阳性（A+），不凝集为Rh阴性（A-）。

微柱凝胶法（自动化）：

1. 将红细胞悬液加入含抗D试剂的凝胶柱；

2. 离心后观察红细胞分布，凝集在上层为阳性，沉底为阴性。

2. 特殊处理

弱D型：部分样本D抗原弱表达，需通过增强试验（如抗球蛋白试验）确认。

三、注意事项与特殊情况

1. 亚型干扰：

A型存在A1、A2等亚型（如A2抗原较弱），需用抗A1试剂区分，避免误判为O型。

2. 新生儿与老年人：

抗原/抗体可能较弱，优先选择试管法或微柱凝胶法，避免玻片法漏检。

3. 疾病影响：

白血病、移植等可能导致抗原减弱，需结合基因检测（如PCR）辅助鉴定。

4. 冷凝集干扰：

低温下非特异性凝集需在37℃复温后重新检测。

四、鉴定流程总结

1. ABO正定型：确认是否为A型；

2. ABO反定型：验证血清抗体是否匹配；

3. Rh(D)抗原检测：确定A+或A-；

4. 亚型与特殊处理：排除干扰因素。

通过以上步骤，可准确鉴定血型为A+或A-。若出现正反定型不符或凝集强度异常，需进一步采用分子生物学技术（如基因测序）或增强试验解决疑难问题。